qPCRBIO SyGreen® 1-Step Kits

qPCRBIO SyGreen® 1-Step Kits は、高速で、特異性が高く、超高感度のリアルタイム RT-PCR 用に設計されています。逆転写酵素技術とバッファー化学の最新開発を使用して、効率的な cDNA 合成とリアルタイム PCR を1本のチューブで実現します。

この堅牢で市場をリードするキットを使用すると、シングルプレックスまたはマルチプレックスの発現研究と診断アッセイを信頼性高く実行できます。最適化されたマスターミックスは、qPCR ベースのジェノタイピングおよび対立遺伝子識別研究にも適しています。このミックスは、qPCRBIO Probe Blue Mix として簡単に視覚化できるよう青色色素を加えたものもご利用いただけます。

アプリケーション

• 絶対的な定量化
• 相対的遺伝子発現解析
• 極度にコピー数の少ないターゲットの検出
• qPCRBIO SyGreen® 1-Step Detect は、反応あたり 1pg ～ 10ng の総 RNA または >0.01pg mRNA のテンプレート量に推奨
• qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go は、反応あたり 10pg ～ 100ng の総 RNA または >0.01pg mRNA のテンプレート量に推奨

qPCRBIO SyGreen® 1-Step Kits とは？

qPCRBIO SyGreen® 1-Step Kits は、mRNA、トータル RNA、ウイルス RNA 配列を含むあらゆる RNA テンプレートの定量に使用できます。

• qPCRBIO SyGreen® 1-Step Detect は感度を重視して設計されており、コピー数が極めて少ないターゲットの検出に最適です。
• qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go は Ct が最も早く、高テンプレート濃度から迅速かつ正確な結果が得られるように配合されています。

キットには、耐熱性があり極めて活性の高い改良型 MMLV 逆転写酵素と、RNase の混入による RNA の分解を防ぐ高度な RNase 阻害剤が含まれています。PCR 増幅は抗体媒介ホットスタート技術によって行われ、プライマーダイマーと非特異的産物の形成を防ぎ、反応の感度と特異性を向上させます。ポリメラーゼ技術の最新開発と高度なバッファー化学を組み合わせることで、最適化を最小限に、または最適化なしで市場をリードするパフォーマンスを提供します。

参考データ１：qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go と競合他社の比較

qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go（紫）と競合他社の Bioline（青）の比較にて、マウスの肝臓から抽出した全 RNA の希釈系列からの ACTG1 遺伝子の増幅トレースを示します。全 RNA 濃度は、20μl 反応あたり 25pg から 250ng まで変化しました。サイクル条件は、cDNA 合成に 45℃ 10分、続いて 95℃ 2分のホットスタート、その後 Roche LC480 で 95℃ 10秒、60℃ 10秒を45サイクルでした。qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go は、高 RNA 濃度では同等のパフォーマンスを示し、低 RNA 濃度では優れたパフォーマンスを示し、増幅曲線間の直線間隔、3～4サイクルの早い増幅、プライマーダイマーの発生率の低下を示しました。

参考データ２：qPCRBIO SyGreen® 1-Step Detect と 1-Step Go の比較

qPCRBIO SyGreen® 1-Step Detect（青）と qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go（紫）の比較。各製品の理想的なテンプレート範囲を示しています。ACTG1 遺伝子は、マウスの肝臓から抽出した全 RNA の希釈系列から増幅されました。qPCRBIO SyGreen® 1-Step Go（紫）は、反応あたり 100pg ～ 100ng の範囲で全 RNA を効率的に増幅します。qPCRBIO SyGreen® 1-Step Detect（青）は、反応あたり 10pg ～ 10ng の範囲で全 RNA を効率的に増幅します（図 a）。サイクル条件は、cDNA 合成に 45℃ 10分、続いて 95℃ 2分のホットスタート、次に 95℃ 10秒、60℃ 30秒の45サイクルで、最後に Roche LC480 で融解分析を行います（図 b）。