qPCRBIO Probe Mix

当社のユニバーサル プローブ qPCR キットは、TaqMan®、Scorpions®、モレキュラービーコン プローブなど、すべてのプローブベースのリアルタイム PCR アッセイで優れた感度と特異性を実現するように設計されています。この堅牢で市場をリードするプローブ キットを使用すると、シングルプレックスまたはマルチプレックスの発現研究と診断アッセイを信頼性高く実行できます。最適化されたマスターミックスは、qPCR ベースのジェノタイピングおよび対立遺伝子識別研究にも適しています。この混合物は、qPCRBIO Probe Blue Mix として簡単に視覚化できるよう青色色素を加えたものもご利用いただけます。

アプリケーション

• 絶対的な定量化
• 相対的遺伝子発現解析
• TaqMan®、Scorpions®、およびモレキュラービーコン プローブ
• 極度にコピー数の少ないターゲットの検出
• リアルタイム PCR 診断
• ジェノタイピングと対立遺伝子の識別

qPCRBIO Probe Mixとは？

qPCRBIO Probe Mix は、プローブベースのリアルタイム PCR のすべてのニーズに応える強力な選択肢です。PCR Biosystems 社のユニバーサル キットを使用すると、コピー数の極めて少ないターゲットを確実に検出し、ゲノム、cDNA、ウイルス配列を含むあらゆる DNA テンプレートを定量化できます。

抗体媒介ホット スタート技術と最新のバッファー化学を組み合わせることで、最適化を最小限に、またはまったく必要とせずに、市場をリードするパフォーマンスを提供します。感度が向上した qPCRBIO Probe Mix は、マルチプレックス化に最適な選択肢になります。qPCR 選択ツールを使用して、どの ROX 変異体がお使いの機器と互換性があるかを調べることができます。

参考データ１：ジェノタイピングのための対立遺伝子識別

味覚2受容体メンバー38（TAS2R38）遺伝子のコドン262のSNP rs1726866用に設計されたTaqMan®プローブを二重反応（TアレルにはVICプローブ、CアレルにはFAMプローブ）に使用し、抽出したゲノムDNAから始めて、20人の被験者の集団でこの多型をスクリーニングしました。蛍光シグナルに基づいて、被験者はフェニルチオカルバミド（苦味）について、非味覚者（Tアレルに対してホモ接合、青い四角）、スーパーテイスター（Cアレルに対してホモ接合、黄色の円）、または中間味者（ヘテロ接合、緑の三角）に分類できます。黒いダイヤモンドは、テンプレートなしのコントロールを示します。PCRBIO Rapid Extract Lysis Kit を使用して上皮細胞（頬粘膜スワブ）から抽出したゲノムDNA 2μLを反応ミックスに追加しました。サイクル条件は、Biorad CFX で 95°C 2 分、95°C 10 秒、60°C 30 秒の 50 サイクルでした。

参考データ２：シングルプレックスアッセイおよびマルチプレックスアッセイにおける qPCRBIO Probe Mix の競合他社との比較

実験 1、2、3 は、cDNA 希釈系列からのシングルプレックスおよびクアッドプレックス (ACVR2B、LIMK1、ACVR1B、CDK7) でのヒト遺伝子 ACVR2B の TaqMan® プローブ増幅トレースを示しています。a) トレースはシングルプレックス反応を示し、b) トレースはクアッドプレックス反応を示しています。qPCRBIO Probe Mix は、Invitrogen (実験 2) および Biorad (実験 3) の最新の競合ミックスと比較してテストされました。qPCRBIO Probe Mix は、Invitrogen および Biorad のミックスと比較して、マルチプレックスの場合に PCR 阻害が最も少ないことを示しています。これは、シングルプレックス (a) と比較してクアッドプレックス (b) でより遅延した増幅トレースで明らかです。実験 4、5、6 は、シングルプレックスおよびクアッドプレックス (ACVR2B、LIMK1、ACVR1B、CDK7) でのヒト遺伝子 LIMK1 の TaqMan® プローブ増幅トレースを示しています。実験 1、2、3 と同様に、qPCRBIO Probe Mix では、テストした競合他社のミックスに比べて、LIMK1 増幅のマルチプレックスでの阻害が少なくなっています。サイクリング条件は、Biorad CFX 機器で 95°C 2 分、95°C 10 秒、60°C 15 秒の 40 サイクルでした。

実験 7、8、9 は、1×10⁶ コピーから 10 コピーの DNA までのプラスミド希釈系列からの TaqMan® プローブ増幅トレースを示しています。各遺伝子について、qPCRBIO Probe Mix は 100% の効率で増幅し、10 コピーの DNA を検出しました。