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CALUX® レポーターアッセイ
PFAS(パーフルオロアルキル物質)は、主要な輸送タンパク質トランスサイレチン(TTR)による天然リガンドであるサイロキシン(T4)の輸送を妨害することにより、甲状腺ホルモンの代謝に干渉することが知られています。PFAS CALUX®アッセイは、この重要な特性を利用して、化学混合物中のさまざまなPFAS化合物の効果を、その構造に関する事前知識に依存せずに測定します。
| 仕様 | PFAS CALUX® |
|---|---|
| 前処理 | 選択的抽出、TTR結合干渉 |
| 読み出し | TRbeta CALUX® |
| 陽性対照 | PFOA |
| エンドポイント(純粋化合物) | ECまたはPC濃度、最小効果濃度(例:PC10) |
| エンドポイント(混合物) | 毒性当量(pg TEQ/g処理サンプル) |
| テスト期間 | 42時間(サンプル処理時間合計) |
| 特異性 | PFAS媒介TTR干渉のみ活性化。リガンドの選択は、化合物クラス選択的ワークアップ法と TTR干渉によって行われる |
| アッセイ干渉 | 精製されたTTRを使用するため、経路特異性の高い読み出しが可能で、最小限 |
| 感度(LOD/Q) | 総レベルは、通常低µg範囲(マトリックスおよびサンプルサイズに依存) |
| 変動制 | …………… |
| Z係数 | …………… |
| マトリックス | あらゆるタイプのサンプル |
| サンプルの体積/質量 | マトリックスおよび所望の(定量限界)LOQに依存 |
| 化合物の量 | 通常は10mg。DMSOで提供される高効力化合物の場合はそれよりずっと低い。 |
| 評価基準 | 関連するアプリケーション/規制に準拠した社内方式。 |
| SOPとガイドライン | BDS内部 |
| HTSプロトコル | まだ利用できません |

PFAS(パーフルオロアルキル物質)は、主要な輸送タンパク質トランスサイレチン(TTR)による天然リガンドであるサイロキシン(T4)の輸送を妨害することにより、甲状腺ホルモンの代謝に干渉することが知られています。PFAS CALUX®アッセイは、この重要な特性を利用して、化学混合物中のさまざまなPFAS化合物の効果を、その構造に関する事前知識に依存せずに測定します。PFAS CALUX®は、TTR結合アッセイとTRbeta CALUXバイオアッセイを組み合わせたものです。T4とTTR結合の妨害は、参照化合物PFOAに対してベンチマークされ、処理されたサンプルあたりのPFOA等価物(PFOA equivalents/g)として表現されます。シンプルなサンプル処理とクリーンアップが必要であり、さまざまなマトリックスに対して成功裏に適用することが可能です。
主な参考文献:Behnisch P, Besselink H, Weber R, Willand W, Huang J, Brouwer A. (2021) Developing potency factors for thyroid hormone disruption by PFASs using TTR-TRβ CALUX® bioassay and assessment of PFASs mixtures in technical products. Environment International 157, 106791