PCRBIO HiFi Polymerase

PCRBIO HiFi Polymerase は、3’-5’ エキソヌクレアーゼ (校正) 活性を持つ Pfu DNA ポリメラーゼから派生したPCR Biosystems 社オリジナルの高忠実度酵素です。いくつかの独自の突然変異点により、ネイティブ型と比較してパフォーマンスが大幅に向上します。高度なバッファー化学と組み合わせることで、この酵素は高忠実度 PCR の世界に強力なパフォーマンスをもたらします。

アプリケーション

• 高忠実度 PCR
• ブラントエンドクローニング
• 部位特異的突然変異誘発
• コロニーPCR
• 「難しい」PCR ： GC/AT リッチ DNA

PCRBIO HiFi Polymerase とは？

PCRBIO HiFi Polymerase は、DNA ポリメラーゼ技術とバッファー化学の最新開発を使用して、PCR の速度、収量、特異性を高めます。この酵素とバッファー システムは、哺乳類のゲノム DNA などの複雑なテンプレートで優れた PCR パフォーマンスを発揮します。DNA 結合が強化されたため、処理能力が向上し、収量が増加し、サイクル時間が短縮されます (5kb 増幅産物の 35 サイクルを 1.5 時間未満で実行)。PCRBIO HiFi Polymerase は、GC と AT リッチの両方を含む幅広いテンプレートで一貫して良好なパフォーマンスを発揮します。

参考データ１：精製されたヒトゲノム DNA に由来する GAPDH からの 5 kb アンプリコンの増幅

精製されたヒトゲノム DNA に由来する GAPDH からの 5 kb アンプリコンの増幅を示します。2倍のテンプレート希釈系列を、開始濃度100ナノグラムのDNAから作製しました。30 秒の変性、30 秒のアニーリング、75 秒の伸長の 25 サイクルが 1 時間で完了しました。最初の行は PCRBIO HiFi Polymerase、2 行目は Finnzymes の同等製品、3 行目は標準 Pfu を示しています。

参考データ２：ゲノム DNA からヒト GAPDH の 60% GC 1kb フラグメントを増幅

PCRBIO HiFi Polymerase がゲノム DNA からヒト GAPDH の 60% GC 1kb フラグメントを増幅する様子を示しています。テンプレートは 100 ナノグラムから始まり、8 桁にわたって 2 倍に希釈されます。最初の行は PCRBIO HiFi Polymerase 、2 行目は Invitrogens Pfx 酵素、3 行目は Finnzymes Phusion 酵素を示しています。

参考データ３：室温で 28 日間安定

4℃、25℃、37℃で 28 日間放置した後でも、PCRBIO HiFi ポリメラーゼで活性の変化が検出されないことを示します。