NGSBIO Library Quant Kit for Illumina®

NGSBIO Library Quant Kit には、Illumina® NGS システム用に準備されたライブラリーの正確かつ高感度な定量化に必要なすべてのコンポーネントが含まれています。このキットは、qPCR を使用してアダプターがライゲーションされた DNA 分子を特異的に定量し、最適なクラスター密度を確保してシーケンス効率とデータの品質を向上させます。

特長

• qPCR を使用して、シーケンス前にライブラリを正確かつ迅速に定量
• 幅広いサンプルタイプ、濃度、フラグメントサイズ、GC 含有量にわたって一貫したライブラリ定量を実現
• すべてのライブラリに対して 1 つの伸長時間を使用
• NGS で配列決定できる DNA 分子のみの特異的な定量が可能
• 抗体媒介ホットスタート技術を使用して、すべての反応を同時に開始
• すべての Illumina® 機器および qPCR プラットフォームと互換性あり
• 手動および自動ワークフローに最適
• 見やすい青色の qPCR ミックスとして入手可能
• オンライン NGSBIO ライブラリ定量ツールでライブラリ濃度を簡単に計算

アプリケーション

• Illumina® システムの NGS ライブラリ定量化

NGSBIO Library Quant Kit for Illumina® とは？

NGSBIO Library Quant Kit は、Illumina® NGS システム用に準備されたライブラリの定量化に信頼性の高い qPCR ベースの方法を提供します。このキットには、5 つの DNA スタンダード、P5 および P7 Illumina® アダプター シーケンスに固有のプライマー、qPCRBIO SyGreen® Mix が含まれています。高度な qPCR バッファー システムは、GC または AT リッチなライブラリを含むすべてのライブラリの効率的な増幅を保証するために、当社のハイスループット スマート スクリーン テクノロジーを使用して開発されました。このキットには、便利なライブラリ希釈バッファーも付属しています。このキットは VeriFi® Library Amplification Mix と併用することもできます。

正確なライブラリ定量化

qPCR は、ライブラリーの増幅とクラスター生成のテンプレートとして使用できるアダプター結合分子のみを測定するため、NGS ライブラリーを定量化するための最良の方法と考えられています。NGSBIO Library Quant Kit を使用すると、最適なクラスター密度とシーケンス効率の向上に不可欠な高精度の定量化が可能になります。

ライブラリーの定量化はアダプターライゲーション後いつでも使用できますが、クラスター生成前に必ず使用する必要があります。簡単かつ正確なデータ分析のために、NGSBIO ライブラリ定量ツールの使用をお勧めします。ライブラリ濃度を過大評価するとクラスター密度が不十分になる可能性があり、ライブラリ濃度を過小評価するとクラスター密度が高く飽和する可能性があります。最適なクラスター密度の詳細については、Illumina® マシンのマニュアルを参照してください。

広いダイナミックレンジ

提供される DNA スタンダードは正確に測定されており、すぐに使用でき、2pM から 0.2fM まで 5 桁の範囲をカバーします。このキットは、PCR 増幅ステップなしで構築されたライブラリを含む低濃度ライブラリの定量化にも適しています。

ユニバーサルキット

NGSBIO Library Quant Kit は、すべての qPCR プラットフォームと互換性があり、幅広いサンプル タイプ、フラグメント サイズ (最大 1000 bp)、濃度、GC 含有量にわたって一貫した再現性のあるライブラリ定量を行うように最適化されています。qPCR 選択ツールを使用して、どの ROX バリアントがお使いの機器と互換性があるかを確認してください。

参考データ１：増幅曲線

アダプターがライゲーションされたライブラリ サンプル (紫色) は、NGSBIO Library Quant Kit Blue で提供される 6 つの標準テンプレート (灰色) と並行して実行されます。

参考データ２：標準曲線

増幅曲線の Ct は、標準テンプレートの濃度の対数に対してプロットされます。標準を通して直線曲線がフィッティングされます。未知のサンプルの濃度は、曲線上の位置から計算されます。

参考データ３：定量化の高い一貫性と再現性

NGSBIO Library Quant Kit (紫)、NEBNext® Library Quant Kit (オレンジ)、および KAPA Library Quantification Kit (緑) を使用した、アダプターが連結された 16 個のライブラリの定量。

NGSBIO Library Quant Kit は、反復間のばらつきが少なく、一貫性が高いことを示しています。定量結果は、NGS ライブラリ定量キットの主要メーカー 2 社によって得られた結果の範囲内です。各グラフの右下隅にある数字は、Invitrogen の Qubit Fluorometer を使用して取得された dsDNA の濃度を表します。