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仕様
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MgCl2, ROX additive, and Sample Loading Buffer
MgCl2、ROX 添加剤、およびサンプルローディングバッファーは、カスタムアッセイ開発のため、またはゲル電気泳動によるダウンストリーム分析を容易にするために、PCR および qPCR 反応に使用できる添加剤です。
| 50 mM MgCl2 | Component:50 mM MgCl2/6 mL:4 x 1.5mL |
|---|---|
| 50 μM ROX Additive | Component:50 μM ROX Additive/6 mL:1 x 200 μL |
| Sample Loading Buffer | Component:6x Sample Loading Buffer A/1 mL:1 x 1 mL/5 mL:5 x 1 mL |
| 保存 | 長期保存の場合は -20 °C ~ -30 °C で保存してください。短期保存または定期的に使用する場合は 4 °C で保存してください。 |
| 機器との互換性 | この製品は、すべての標準および高速サイクリング qPCR 機器と互換性があります。qPCR 選択ツールを使用して、どの ROX バリアントがお使いの機器と互換性があるかを確認してください。 |
MgCl2、ROX 添加剤、およびサンプルローディングバッファーは、カスタムアッセイ開発のため、またはゲル電気泳動によるダウンストリーム分析を容易にするために、PCR および qPCR 反応に使用できる添加剤です。

PCR グレードの塩化マグネシウム:PCR および qPCR 反応における Mg2+ イオン濃度を最適化するために使用されます。
qPCR 用の ROX Additive Solution:リアルタイム PCR データ取得中にウェル間の蛍光の変動を低減するために使用されるパッシブリファレンス色素として最も一般的に使用されます。
6x Sample Loading Buffer:ゲル電気泳動ワークフローにおける DNA 移動の追跡を可能にする 2 つのトラッキング色素を含むゲルローディング ソリューションです。
PCR 反応に最適化された PCR Biosystems 社の塩化マグネシウム溶液は、標準およびマルチプレックス PCR アプリケーションで一貫した効率的な増幅を保証します。すぐに使用できる形式で提供され、DNA ポリメラーゼなどの DNA 操作酵素の必須補因子として酵素活性と増幅特異性を高めることができます。この 50 mM 溶液は、PCR および qPCR 反応における Mg2+ イオン濃度の最適化を目的としています。
PCR Biosystems 社のポリメラーゼ キットおよびミックスは、最適化された塩化マグネシウム濃度で提供されており、通常はそれ以上追加する必要はありません。ただし、一部のアッセイでは、さらにカスタマイズが必要になる場合があります。個々の反応における理想的なマグネシウム濃度は、テンプレート、バッファー、および dNTP によって異なります。追加する場合は、慎重に滴定し、反応のパフォーマンスを変更されていない反応と比較する必要があります。
正確なリアルタイム PCR データの正規化が可能になります。PCR Biosystems 社の ROX 添加剤は、リアルタイム qPCR における蛍光シグナルを正規化し、ウェル間の変動を補正するためのパッシブリファレンス色素として使用される 5-カルボキシ-X-ローダミンエステルの安定化コンジュゲートです。色素は 50 μM の濃度で供給され、高 ROX 濃度(500 nM)を必要とする機器では 100 倍のストック溶液として、低 ROX 濃度(50 nM)を必要とする機器では 1000 倍のストックとして使用できます。
PCR Biosystems 社は、最大限の使いやすさを実現するために、ほとんどの qPCR 製品をプレミックスされた別個のチューブおよび no-ROX 配合で供給しています。この製品は、追加の ROX が必要な場合やオーダーメイドのアッセイの開発での使用を目的としています。
電気泳動ワークフロー用に設計された 6x ゲルローディングバッファーを使用すると、正確で効率的な DNA/RNA サンプルの視覚化が容易になります。このバッファーには、鮮明なバンドの視覚化のためにキシレンシアノール、ボルモフェノールブルー、グリセロールが含まれており、電気泳動実験のセットアップ時にウェル内の核酸を保持します。アガロースゲルとポリアクリルアミドゲルの両方に適しており、PCR Biosystems のすべてのエンドポイント試薬、およびゲルローディングダイ(PCRBIO Red Mixes など)を含まない他のサプライヤーの標準 PCR 製品で使用できます。2 つのトラッキングダイは、2% TAE アガロースゲルでは約 150 bp と 800 bp、1% TAE アガロースゲルでは約 500 bp と 4,000 bp で移動します。
PCR または qPCR 反応にはどのくらいの量の塩化マグネシウムを加えるべきですか?
バッファーの組成は PCR の成功率を最大化するように最適化されているため、反応に PCR エンハンサーまたは塩化マグネシウムをさらに追加することは推奨されません。ただし、カスタマイズされたアッセイを開発する場合は、追加の塩化マグネシウムを 0.5 mM ずつ最大 5~7 mM まで追加し、結果を未修正の反応と比較する必要があります。
qPCR 反応にどのくらいの量の ROX を追加すればよいですか?
染料は 50 μM 濃度で供給され、高 ROX 濃度(500 nM)を必要とする機器では 100 倍ストック溶液として、低 ROX 濃度(50 nM)を必要とする機器では 1000 倍ストックとして使用できます。qPCR 選択ツールを使用して、お使いの機器に適した ROX 濃度を特定してください。お使いの機器モデルがリストにない場合は、製造元の説明書を参照するかお問い合わせください。PCR Biosystems 社は、最大限の使いやすさを実現するために、ほとんどの qPCR 製品をプレミックス済みの別個のチューブおよび no-ROX 配合で供給しています。
PCRBIO 製品に塩化マグネシウムを追加する必要がありますか?
PCR Biosystems 社のポリメラーゼ キットおよびミックスは、最適化された塩化マグネシウム濃度で提供されており、通常はそれ以上追加する必要はありません。ただし、一部のアッセイではさらにカスタマイズが必要な場合があります。